Considerando que la seguridad del paciente es un problema de salud pública, la Organización Mundial de la Salud (OMS) en los esfuerzos por reducir el número de defunciones y errores adversos de origen quirúrgico, efectuó un plan dirigido a optimizar la seguridad de la atención quirúrgica a nivel mundial, que aborda aspectos importantes como las infecciones quirúrgicas evitables, las prácticas anestésicas, y escasa comunicación entre los miembros de los equipos quirúrgicos. La investigación titulada “CONOCIMIENTO Y APLICACIÓN DE LA LISTA DE VERIFICACIÓN DE CIRUGÍA SEGURA POR EL PROFESIONAL DE ENFERMERÍA EN EL SERVICIO DE CIRUGÍA DEL HOSPITAL REGIONAL MARISCAL LLERENA – AYACUCHO, 2023”, tuvo como objetivo determinar la relación entre el conocimiento sobre la lista de verificación de cirugía segura y su aplicación por el profesional de enfermería (instrumentista) en el servicio de cirugía del Hospital Regional Ayacucho. Metodología: enfoque cuantitativo, correlacional; se realizó una encuesta a 36 enfermeros instrumentistas. Resultados: mediante la prueba de independencia del Chi- cuadrado (p valor < 0.05) y el coeficiente de correlación Rho de Spearman, con valor de 0.40, por lo tanto existe una relación moderada entre el nivel de conocimiento sobre la lista de verificación de cirugía segura y el cumplimiento en la aplicación por el profesional de enfermería en el servicio de cirugía del Hospital Regional Ayacucho-Mariscal Llerena-2023, lo cual se contrasta con los resultados descriptivos, donde evidencia que el 75.0% del personal profesional de enfermería del área de cirugía tiene un conocimiento medio y el 94.4% tiene un nivel de cumplimiento alto.