El presente trabajo tuvo por objetivo determinar la relación que existe entre el nivel de conocimiento y la práctica del profesional de enfermería en el cuidado inmediato del recién nacido sano en el servicio de neonatología del Hospital Regional Miguel Ángel Mariscal Llerena Ayacucho, 2022. Metodológicamente el trabajo fue desarrollado bajo un enfoque cuantitativo, tipo descriptivo, diseño no experimental, nivel correlacional, y el método aplicado fue analítico y el hipotético deductivo, la muestra estuvo integrada por 50 profesionales de Enfermería, se aplicó un cuestionario para el nivel de conocimiento y una ficha de registro para las prácticas de cuidado. Los resultados reflejaron que el 92.0% de los profesionales eran del género femenino, el tiempo laboral mayoritario fue de 1 a 3 años en un 36.0%, el nivel de conocimiento sobre el cuidado inmediato del recién nacido fue deficiente en un 58.0% y las prácticas del cuidado inmediato del recién nacido fueron deficientes en un 92.0%. Se concluyó que existe relación entre el nivel de conocimiento y la práctica del profesional de enfermería en el cuidado inmediato del recién nacido sano en el servicio de neonatología del Hospital Regional Miguel Ángel Mariscal Llerena Ayacucho.2022, presentándose una significancia igual a 0.000.