El objetivo del estudio fue determinar la relación de los métodos de esterilización y el manejo del instrumental quirúrgico por el profesional de enfermería en el Hospital Es Salud II, Ayacucho 2022. Fue una investigación de enfoque cuantitativo, con un nivel básico, de tipo descriptiva correlacional y un diseño experimental de corte transversal, asimismo la muestra fue 30 profesionales de enfermería del centro quirúrgico del Hospital Es Salud II-Ayacucho, 2022. Se utilizó como técnica la encuesta y como instrumento el cuestionario con opción múltiple de 20 preguntas se utilizó el software estadístico SPSS versión 26 para el procesamiento de datos, obteniéndose los siguientes resultados: el 50% del personal de enfermería del Hospital EsSalud II de Ayacucho utilizan adecuadamente los métodos de esterilización del material quirúrgico y manejan el material instrumental quirúrgico correctamente, mientras que el 30% usan métodos de esterilización inadecuadamente y manejan incorrectamente, existe relación significativa entre ambas variables (p=0,001<0,05). El 43,3% emplean adecuadamente los métodos físicos de esterilización y 26,7% manejan incorrectamente el instrumental quirúrgico. Conclusión: existe relación significativa entre ambos variables (p=0,029 <0,05). El 50% del personal de enfermería del Hospital EsSalud II de Ayacucho emplean adecuadamente los métodos químicos de esterilización y 30% manejan incorrectamente el instrumental quirúrgico, se halló relación significativa entre ambos variables (p=0,001 <0,05).